本文標(biāo)題："植物化石粉粒超微結(jié)構(gòu)分析電子顯微鏡技術(shù)"
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植物化石粉粒超微結(jié)構(gòu)分析電子顯微鏡技術(shù)
過量染液的沉淀產(chǎn)生的假象可能被解釋為花粉或孢子壁的不同組成成分
，或者染色過度，從而導(dǎo)致觀察不到特定結(jié)構(gòu)。僅僅根據(jù)無法控制染色方
案的幾張切片來討論有關(guān)壁層個體發(fā)育的結(jié)論是不準(zhǔn)確的；同時，僅僅根
據(jù)一個花粉粒的幾張切片，可能會觀察不到萌發(fā)孔器或特定細小結(jié)構(gòu)。并
非所有的孢粉顆粒都處于相同的發(fā)育階段，同時其保存條件也不盡相同，
故沒有一種通用染色方案。這樣就要求研究人員對不同濃度的染液摸索其
染色時間，并將染色方案仔細地記述在論文的切片方法中。
包埋和定位
除了需要對許多顆粒切片，在超微切片之前，需要對每個花粉粒或孢
子進行準(zhǔn)確定位。有幾種方法可用來定位，一種方法是用薄晶片來包埋標(biāo)
本，使得在切片時能看到并定位顆粒。最常用的化石孢粉粒包埋材料是Epo
n-Araldite或Spurr低粘度樹脂(生產(chǎn)商提供了如何制備不同硬度樹脂的說
明書；美國的EM供應(yīng)商)。例如，大花粉粒或孢粉可以在淺的鋁質(zhì)平底鍋(
直徑為4．ocm)中直接包埋?；叻哿５陌褚部梢詫⒒ǚ哿＜拥揭坏螛?/div>
脂上，樹脂滴位于兩個鍍有聚四氟乙烯的標(biāo)準(zhǔn)顯微鏡玻片之間，并在透射
光下觀察晶片，選擇理想的花粉粒。另一方法適用于小花粉?；蚍稚悠?/div>
，用吸管把花粉粒吸到纖維素濾器上，接著在瓊脂中對濾器雙面鍍膜。將
這些濾器脫水，并在淺平底鍋中用樹脂逐漸浸透。還有一種方法是將花粉
粒放在小塊瓊脂中，對瓊脂塊用4％的低聚甲醛和2％的鋨酸處理，再用不
同濃度乙醇逐步脫水，隨后移入氧化丙烯中，并用Epon-Araldite包埋。所
有這些方法為了能夠從樹脂晶片中切下一小塊含有花粉粒的塊體，將該塊
體用膠水粘到一根苯乙烯的桿上，并將該桿固定在超薄切片機的卡盤上，
這樣確保切片處于一個理想的方位。斜面可能會出現(xiàn)對花粉粒結(jié)構(gòu)和壁層
厚度的不準(zhǔn)確結(jié)果，特別是壓型花粉粒，故切片的準(zhǔn)確定位特別重要。有
一個恰當(dāng)?shù)睦诱f明了這一點。內(nèi)網(wǎng)是具真氣囊花粉粒的氣囊內(nèi)壁延伸
一小段距離而形成的。雖然原氣囊花粉粒表面可能具有與真氣囊型花粉相
似性特征，但是這些氣囊含有從氣囊內(nèi)壁一直延伸到氣囊本體外表面的細
線。在一個穿過內(nèi)網(wǎng)的斜切片上，有可能將真氣囊花粉粒誤認為原氣囊型
的花粉粒(Osborn&Taylor，1993)。上述兩種顆粒的識別，有利于解釋花粉
壁的形成，甚至氣囊的演化，同時是系統(tǒng)發(fā)育重建中一個潛在的重要特征
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