本文標(biāo)題："測(cè)定由氨基酸-離子材料上進(jìn)行氣液層析"
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比色計(jì)測(cè)定由氨基酸-離子材料上進(jìn)行氣液層析
蛋白質(zhì)水解物一類的樣品在低pH的情況下通過(guò)一個(gè)注
射系統(tǒng)被引入，并用泵打到強(qiáng)酸性離子交換樹(shù)脂上。具有不
同離子強(qiáng)度和不同pH的緩沖液在一個(gè)特殊的梯度腔中混合，
使混合后的緩沖液的pH和離子強(qiáng)度逐漸增加，然后用一個(gè)泵
將這種緩沖液通過(guò)柱進(jìn)行洗脫。從柱上下來(lái)的洗脫液和茍三
酮顏色試劑混合，同時(shí)也引人氮?dú)庑纬梢粋€(gè)有規(guī)律的氣泡，以
防止被洗脫的化合物過(guò)分的混合。然后混合物在油浴上加熱
顯色，通過(guò)一個(gè)冷卻的螺旋管，再通過(guò)一個(gè)調(diào)置在570毫微米
的比色計(jì)測(cè)定由氨基酸和荀三酮反應(yīng)所產(chǎn)生的藍(lán)顏色。比色
計(jì)和一個(gè)雙道記錄儀相聯(lián)，記錄了從柱上下來(lái)的洗脫液的連
續(xù)圖形。脯氨酸和經(jīng)基脯氨酸與荀三酮產(chǎn)生黃顏色，因此洗
脫液經(jīng)過(guò)第二個(gè)調(diào)置在440毫微米的比色計(jì)來(lái)測(cè)定這二種氨
基酸的量，結(jié)果被記錄在記錄儀上。很多系統(tǒng)使用二根柱，第
二根柱是堿性陰離子交換樹(shù)脂，用于分離堿性氨基酸和氨。
改良過(guò)的纖維素對(duì)于大分子(如蛋白質(zhì)和核蛋白)的離子
交換分離也是特別有用的。這些大分子因?yàn)樗鼈儾荒軡B人到
交聯(lián)的結(jié)構(gòu)中，因此不能在一般的樹(shù)脂上被分離。但是，纖維
素是纖維狀的，功能基團(tuán)主要都在表面，對(duì)于大分子的交換十
分有效。狡甲基纖維素(CM一纖維素，其CH2OH被CH2OCFI2
COO一基團(tuán)所取代)是一種十分有用的陽(yáng)離子交換劑，二乙氨
乙基纖維素(DEAE一纖維素)同樣也是一種很有用的陰離子
交換劑。最近，已廣泛地使用了在離子交換材料上進(jìn)行的氣
液層析。
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