本文標題:"標記分析細胞實驗適合使用熒光顯微鏡觀察"
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標記分析細胞實驗適合使用熒光顯微鏡觀察
采用GFP對細菌標記已成為一個普通的方法,然而一個棘手的問題卻很少引起人
們的注意,即GFP及其變種能否指示細胞活力。
也就是,在顯微鏡下觀察到的所有發(fā)出熒光的GFP標記細胞是否都可以認為是活細胞?
Lowder等報告說,Pseudomonas fluo-rescens的死亡細胞與GFP從細胞泄露之間存
在很強的相關(guān)性。
大多數(shù)死細胞(活力染色法)無GFP熒光,有小比例的細胞雖然死亡但仍具有綠色熒光。
我們將GFP標記S. enlerica細胞經(jīng)過高溫、干燥或次抓酸鈣等致死因素處理后也得到
了相似的研究結(jié)果。
因此,GFP作為活細胞內(nèi)穩(wěn)定的熒光物質(zhì)會因細菌細胞死亡而迅速消失。但是,
因為少數(shù)熒光細胞的生理狀態(tài)不清楚,所以在采用GFP標記法分析細胞活力時,最好
是再采用另外一種方法來對結(jié)果進行確認。
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