本文標(biāo)題:"酵母菌初始細(xì)胞數(shù)對(duì)細(xì)胞增生測(cè)試的影響"
酵母菌初始細(xì)胞數(shù)對(duì)細(xì)胞增生測(cè)試的影響
因此次試驗(yàn)個(gè)數(shù)眾多,故以96孔盤配合酵素分析儀做為推估細(xì)胞生長(zhǎng)情形,觀測(cè)雌性激素對(duì)酵母菌增生情形,
以乙基雌二醇為測(cè)試對(duì)象,在初始細(xì)胞數(shù)不同時(shí),培養(yǎng)24小時(shí)的結(jié)果如圖五,空白試驗(yàn)于低細(xì)胞濃度初始值
如1000或10000 cell/ well下,吸光值并沒(méi)有明顯增加,但是酵母菌細(xì)胞數(shù)濃度在50000、100000 cell/ well,
即使沒(méi)有雌性激素,吸光值仍明顯高于細(xì)胞數(shù)1000 cell/ well之吸光值,且估計(jì)約有3 x 106cell/ well,
由此數(shù)據(jù)顯示似乎酵母菌有增生的情形,但是由于96孔盤孔徑小,所容許的培養(yǎng)液僅200 m L,
培養(yǎng)液于培養(yǎng)過(guò)程中不易隨軌道震蕩器搖晃,使達(dá)混合菌液的目的,又因酵母菌細(xì)胞比重較大,
在培養(yǎng)液中若不經(jīng)搖晃混合。容易自然沉降至底部,造成細(xì)胞凝集的現(xiàn)象,使得吸光度增高,
而高估細(xì)胞濃度,所以推論空白試驗(yàn)在初始細(xì)胞數(shù)高的情況下,由于細(xì)胞的凝集而造成細(xì)胞增生的假象,
因以96孔盤進(jìn)行此試驗(yàn)僅能初步觀察其有無(wú)明顯雌性激素增生,而無(wú)法進(jìn)行定量的計(jì)算。
細(xì)胞濃度1,000 cell/ well在乙基雌二醇濃度0.2 ppb時(shí)有明顯吸光值,但是0.2至5 ppb吸光值無(wú)明顯差異(p<0.05
細(xì)胞濃度10,000 cell/ well在乙基雌二醇濃度0.05 ppb時(shí),有明顯吸光值隨著乙基雌二醇濃度增加吸光值明顯增
加,細(xì)胞濃度50,000、100,000 cell/ well在乙基雌二醇濃度0.05 ppb時(shí)就有明顯吸光值
以96孔盤觀察不同初始細(xì)胞濃度對(duì)雌二醇刺激酵母菌增生的情形,以雌二雌培養(yǎng)酵母菌效果不若乙基雌二醇佳,
空白組在初始濃度如同乙基雌二醇試驗(yàn)一般,50,000及100,000 cell/ well也有增生的假象,
細(xì)胞數(shù)除了初始細(xì)胞濃度為10000 cell/ well有明顯的增生,50,000及100,000 cell/ well雖有增生,
但增生細(xì)胞數(shù)并不與濃度成正相關(guān)。因培養(yǎng)液不易混合均勻,而使細(xì)胞凝集造成測(cè)值與濃度不容易有明顯正相
關(guān),故以96孔盤進(jìn)行測(cè)試,僅能初步篩選其對(duì)酵母菌有無(wú)促其增生的效果的定性推測(cè),而無(wú)法定量觀察。
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